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   溃疡病在不同柑橘品种之发生及其防治药剂筛选






    

    摘 要

    比较16 种柑橘品种对细菌性溃疡病(citrus bacterial canker) 的罹病程度,叶片部分以帝王柚罹病率45.3% 为最高,其次为莱姆、柠檬及明尼橘柚等,耐病性较佳的有文旦( 罹病率0.2%)、椪柑、茂谷柑及柳橙等。帝王柚及莱姆叶片溃疡病之发病高峰期在4 月中旬~6月下旬,适逢最大累积雨量在5~6 月间(169.1~735.2 mm) 。 6月间调查不同柑橘品种果实之溃疡病发病情形,以脐橙罹病率平均35.1% 为最高、其次为帝王柚(平均35.1%) 及莱姆( 平均16.8%) ,文旦果实罹病率平均0.1%为最低。柑桔溃疡病菌室内药剂筛选试验结果显示,除了推荐药剂10% 维利霉素溶液800 倍外,68.8% 多保链霉素可湿性粉剂1,000倍、85% 碱性氯氧化铜可湿性粉剂300倍与10% 链四环霉素水溶性粉剂1,000倍等均有抑菌的效果。柑橘溃疡病田间药剂防治试验,10% 维利霉素溶液500倍防治效果最佳,平均罹病率3.3﹪。另外,亚磷酸500倍喷施嫩叶易引起肥伤,造成落叶。

    关键字:柑橘、柑橘细菌性溃疡病、Xanthomonas citri subsp. citri 、罹病率、防治、药剂。

    前 言

    柑橘是台湾的重要经济果树,依据行政院农业委员会98年台湾省农业年报统计,全国栽植面积为29,967 ha,收获面积在29,072 ha,产量为536,433 t 。目前中部地区( 台中县、彰化县、南投县及台中市) 柑橘栽种面积为4,460 ha ,收获面积为4,312 ha ,产量为73,118 t,以台中县栽种面积为2,625 ha 最多,占中部柑橘产区一半以上,其次为南投县1,171 ha 。栽种的种类以椪柑最多,面积为1,722 ha ,其次依续为柳橙837 ha 及桶柑702 ha 等。在台湾柑橘栽种历史悠久,至光复为止,台湾柑橘种类已有32种之多。如今随着大众运输便捷,其他柑橘种类引进迅速,且日新月异,并逐渐扩增之中,其中引进种类之多,包括茂谷柑、脐橙、明尼橘柚、佛利檬柑、无酸橙、血橙、蜜柚、文旦柚、西施柚、白柚、帝王柚、金橘、甜橘、帝王柑、莱姆、三宝柑、艳阳柑、佛手柑、金柑、柠檬……等。但相对之下,病虫害也随着不同管道而进入,在台湾发现的柑橘病害种类约有92种( 生理病除外),其中病原细菌2 种,即溃疡病( Xanthomonascitri subsp. citri ) 与柑橘黄龙病(candidatus Libaerobacrer asiatium) 。病原真菌有79种,包括黑点病( Diaporthe citri FA Wolf.) 、黑星病( Guignardia citricarpa (Mcalp.) Kiely) 、白粉病( Acrosporium tingitaninum (Carter) Subram)、疮痂病( Elsinoe fawcettii Bitancourt & Jenkins) 、油斑病( Mycosphaerella citri Whiteside)、绿霉病( Penicillium digitatum Sacc.)、裾腐病( Phytophthora parasitica, P. palmivora, P. citrophthora)、蒂腐病( Botryosphaeria rhodina (Cooke)Arx) 、根腐病( Phytophthota parasitica Dastur、 P. palmivora E. J)、赤衣病( Erythriciumsalmonicolor (Berk. & Broom.) Burds) 、白纹羽病( Rosellinia necatrix Prill.) 、褐腐病( Phytophthota citrophthora (R. & E. Smith) Leonian) 等。病毒有5 种,包括南非立枯病病毒、鳞砧病( exocortis viroid (CEV)) 、鳞皮病、凹陷树胶病及木孔病等(1,3,7,8,12,14)。植物菌质体(Phytoplasma) 1 种及6 种线虫(10,11)。柑橘溃疡病现已分布于全世界柑橘栽植区,本病自1910年自日本罹病砧传入墨西哥各州,再进入佛州,刚好当地气候环境适宜本病大发生,因此当地耗费600 万美金才将该病消灭,但也造成25万成株与300 万株苗付之一炬,为了防患本病及避免损失,必需提早预防及防治(3,7)。本病原细菌为短杆状单极生鞭毛,大小为0.5~0.7 μ m×1.1~2.0 μ m ,具黏性黄色菌落,生长温度在10~38 ℃之间,在干燥的环境下无法传播,于水膜中,可藉由鞭毛游动,直接侵入植株的伤口或气孔,感染组织形成病斑。在台湾每年4 至10月为发病季节,病原细菌在前一年叶片、枝条及枯枝落叶上的病斑越冬,亦可在杂草及土壤中残存,于春季气温在20℃以上,在原越冬的病斑上增殖,春稍发育期间,如遇降雨可随风传播飞溅,连续降雨量40~50 mm 以上,相对湿度90% 以上,适合本病原菌之繁殖,因此在台湾梅雨季节以及夏秋季台风时期,风速达7~10 m/s 即适合发病与病势进展(7)。藉由柑橘类整枝修剪器具、潜叶蛾及其他小动物造成之伤口,溃疡病菌可侵入寄主幼嫩组织,诱发该病害。本病原细菌可为害嫩叶、嫩枝及果实,受感染嫩叶或带有伤口的成熟叶片,初期呈现透明水浸状墨绿色斑点,斑点逐渐变为褐色,感染后期表皮隆起木栓化引起表皮破裂,中央部位呈现灰白色凹陷,病斑周围产生黄色晕环,以手触摸可感觉表面粗糙坚硬,发病严重时病斑会融合而成不规则状之大块疤,叶之正反两面皆会被感染,但成熟叶不易罹病。枝条病征与叶片相似,然病斑边缘缺乏黄色晕环。各品种间果实溃疡病病斑大小差异很大,初期病征与叶片、果实相似,仅少部分品种有黄色晕环,表面产生木栓化更严重且粗糙,严重时会导致畸形(3,4,8,10,11,14)。柑橘溃疡病之防治方式,依99年植物保护手册推荐,于发病初期开始使用10% 维利霉素溶液800 倍、72% 波尔多可湿性粉剂500 倍、56% 氧化亚铜可湿性粉剂600 倍或81.3% 嘉赐铜可湿性粉剂1,000倍进行防治。本试验目的在了解溃疡病在不同柑橘品种叶片及果实对柑橘细菌性溃疡病(citrus bacterial canker) 之罹病程度,进行室内不同化学药剂对于柑橘溃疡病菌的抑制情形及田间测试不同化学药剂对于溃疡病的防治效果,以作为提供柑橘溃疡病管理的参考。

    材料与方法

    罹病率调查

    于2007年在南投县名间乡柑橘产区设试验田乙处面积0.1 ha ,全年不施农药,进行不同47柑橘品种对柑橘溃疡病之发病调查,每隔15天调查一次。供试品系包含柳橙( Citrus sinensisOsbeck var. liucheng Hort., Golden seal orange) 、椪柑( C. reticulata Blanco; Nagpur suntara) 、脐橙( C. sinensis Osbeck var. brasiliensis Tanaka, Navel Oranges)、茂谷柑(Climentine x Citrussinensis Osbeck.; Murcott)、桶柑( C. tankan Hayata, Tankan)、文旦( C. maxima f. buntan ( Hayata)Hort., Shaddock)、血橙(Pigmented orange) 、帝王柚(King shaddock) 、柠檬( C. limon Burm.,Limon)、莱姆( C. aurantifolia (Christm) Swingle, Lime)、明尼橘柚( C. tangerin a Hort. ex Tanaka;C. reticulata × C. paradisi , Minneola tangelo) 、佛利檬柑( Fremont ) 、西施柚( C. grandis (L.)Osbeck, Oroblanco)、金柑( Fortunella margarita (Christm.) Swingle., Oval kumquat) 、酸橘( C.nobilis Lour. var. sunki Hort., Sunki) 及甜橘( C. microcarpa Bonge., Calamondin) 等16种。(1)叶片溃疡病田间调查:于3~6 月,每月调查2 次,调查16个品种的柑橘嫩叶及嫩枝条,逢机选择展开叶25片( 枝) ,四重复,共计64株。调查日期分别为2007年3 月2 日、3 月26日、4 月10日、4 月19日;5 月10日、5 月22日、6 月12日及6 月23日,共8 次。每区逢机调查100 个叶片,每一叶片发病面积大小分级如下,0 :未发病;1 :发病面积占全叶1~5%;2 :发病面积占全叶6~25% ;3 :发病面积占全叶26~50% ;4 :发病面积占全叶51% 以上,并以下列公式算出罹病度。罹病度(%) =Σ ( 指数× 该指数罹病叶数)/(4×总调查叶数)×100% 。

    果实溃疡病田间消长调查:分别于2007年6 月12日及6 月23日,逢机选调查各柑橘果实100颗,四重复,每一果实发病面积大小分级如下,0:未发病;1:发病面积占全果1~5%;2 :发病面积占全果6~25% ;3 :发病面积占全果26~50%;4 :发病面积占全果51% 以上,并以下列公式算出罹病度。罹病度(%) =Σ ( 指数× 该指数罹病果实数)/(4×总调查果实数)×100% 。

    柑橘溃疡病室内药剂试验

    供试菌株分离自南投水里乡之柑橘园中的柑桔溃疡病病叶,再回接寄主进行接种确认病原性,经由细菌自动鉴定系统(Biolog system)鉴定为Xanthomonas citri subsp. citri(13),后以Xac-1 为菌株代号,供试药剂为77.5% 嘉赐铜可湿性粉剂1,000倍、72% 波尔多可湿性粉剂500倍、亚磷酸800 倍混和氢氧化钾800 倍、10% 维利霉素溶液800 倍、76% 铜灭达乐可湿性粉剂1,000倍、纯白链霉素800 倍、40% 铜快得宁可湿性粉剂500 倍、85% 碱性氯氧化铜可湿性粉剂300 倍、68.8% 多保链霉素可湿性粉剂1,000倍、10% 链四环霉素水溶性粉剂1,000倍、10% 克枯烂可湿性粉剂1,000倍、3%嘉赐霉素溶液250 倍与77% 氢氧化铜可湿性粉剂600 倍等,并以无菌蒸馏水作为对照处理。

    (1)滤纸圆盘法试验:直径0.6 cm 之滤纸圆盘(Whatman, No. AA) 经过高压灭菌后,分别浸泡于供试药剂稀释液5 分钟,之后置于无菌箱中吹干。制备柑橘溃疡菌浓度为108cfu/ml ,取200μ l 以灭菌后之棉花棒,均匀涂抹于NA培养基上,之后将前述之含有药剂之滤纸圆盘放置混有Xac-1菌株之NA培养基平板上。另以浸渍无菌水之滤纸圆盘为对照处理。每个处理三重复,置于28℃的培养箱中震荡培养,三天后测量抑制圈直径(6,9,11)。48田间防治试验在南投县名间乡柑橘产区设试验田乙处( 果园坐西朝东) 面积0.1 ha ,于溃疡病发生期间,平均每7 天施药一次,连续5 次,供试作物品系为脐橙,试验材料采用亚磷酸500 倍、亚磷酸800倍、10% 维利霉素溶液500 倍、10% 维利霉素溶液800 倍、72% 波尔多液可湿性粉剂500 倍、81.3%嘉赐铜可湿性粉剂1,000倍及对照不施药等试验处理。田间设计:采逢机完全区集设计,每小区3 棵,7 处理,4 重复。施药方法:于6~7 月间新梢萌发期间施药,以后每隔7 天施药一次,连续5 次,施药日期分别为2007年6 月26 日、7 月3 日、7 月10日、7 月17日及7 月24日。调查方法:第一次施药前(2007 年6 月26日)、第三次施药前(2007 年7 月10日) 及最后一次施药后7 天(2007 年7 月31日) 各调查一次。每株调查萌发之20新梢,每枝由上向下调查5 叶,共计算100 叶片之病斑数。再换算成罹病度。罹病度级数之换算如下:1 级:病斑数1~3 者。 2 级:病斑数4~10者。3 级:11病斑以上者,并依下列公式算出罹病度。罹病度(%) =【 Σ ( 指数× 该指罹病叶片数)/(3×总调查叶片数) 】×100。

    结 果

    不同柑橘品种对溃疡病之罹病率调查

    于2007年选择南投县名间乡柑橘产区,调查不同柑橘品种叶片的溃疡病罹病率,不同调查时期结果显示帝王柚罹病率最高,占45.3% (6/23) 、37.6% (6/12) 、33.1% (5/22) ,依序为莱姆罹病率为37.5% (6/23)、32.5% (6/12)、柠檬24.3% (4/10)、明尼橘柚20.4% (4/19)、脐橙19.6%(4/19) 、金柑13.2% (3/2)、甜橘13.5% (3/26) 、酸橘8.5% (4/10)、西施柚8.4% (4/10)、桶柑2.5%(6/12) 、血橙2.1% (6/23)、佛利檬柑0.9% (6/23)、柳橙0.6% (6/23)、茂谷柑0.6% (6/23)、椪柑0.6% (6/23)、文旦0.2% (4/19)(图一) 。

    (1)柑橘叶片溃疡病田间消长调查:帝王柚及莱姆发病高峰期在4 月中旬~6月下旬;柠檬发病高峰期则在3 月上旬~4月下旬;明尼橘柚发病高峰期则在4 月中旬~5月上旬;脐橙发病高峰期则在4 月上旬~5月上旬;甜橘发病高峰期则在3 月上旬~4月上旬( 图一) 。

    (2)柑橘果实溃疡病田间消长调查:调查发现春梢幼叶罹病后,病菌增多,经由风雨的帮助,再传播至幼果上,造成幼果罹病,于2007年6 月在南投县名间乡调查果实溃疡病发病情形,罹病率最高依序为脐橙、帝王柚及莱姆,平均罹病率分别为35.1% 、35.1% 及16.8% 。罹病率最低依序为文旦及柳橙,平均罹病率分别为0.1%及0.2% ( 图二) 。

    柑橘溃疡病菌药剂试验

    以滤纸圆盘法进行市面上之多种药剂筛选试验,结果如表一所示,68.8% 多保链霉素可湿性粉剂处理之抑制圈大于3.0 cm 、85% 碱性氯氧化铜可湿性粉剂与10% 链四环霉素水溶性粉剂处理之抑制圈介于2.0~3.0 cm 间;10% 维利霉素溶液,76% 铜灭达乐可湿性粉剂、700 pcu/g纯白链霉素水溶性粉剂与40% 铜快得宁可湿性粉剂与处理之抑制圈分别介于1.0~2.0 cm 间,其余测试药剂对检测溃病无抑制力。

    柑橘溃疡病田间防治试验

    2007年6 月26日第一次施药前调查,溃疡病罹病率为0 。 2007年7 月10日第三次施药前调查,施用亚磷酸稀释500 倍、亚磷酸稀释800 倍、10% 维利霉素溶液稀释500 倍、10% 维利霉素溶液稀释800 倍( 及72% 波尔多可湿性粉剂稀释500 倍之植株平均罹病率分别为0.2、1.0、0.5、1.0及0.4%,与不处理之对照罹病率6.2%有显著性差异( 表二) 。 2007年7 月31日第五次施药后7天调查,与不处理之对照植株罹病率18.8% 比较,施用供试药剂之植株溃疡病罹病率均显著降低,其中以施用10% 维利霉素溶液稀释500 倍之防治效果最佳,罹病率在3.3% ( 表二) 。

    讨 论

    根据文献记载几乎所有的柑橘均会感染溃疡病(3,4),其中以葡萄柚最易罹病,其次依序为枳壳、莱姆、甜橙、柠檬及温州蜜柑等,耐病性较佳有丹赛蜜柑、四季橘、枸橼及金柑等(1,2,3,7,8)。本研究进行不同柑橘品种对溃疡病之罹病率调查,显示帝王柚罹病率最高,依序为莱姆、柠檬及明尼橘柚等,耐病性较佳有文旦、椪柑、茂谷柑及柳橙等( 图一) 。在气温25~30 ℃下,雨量和雨日与溃疡病的发生成正相关,高温多湿的季节有利于溃疡病菌的繁殖,经雨水媒介病势进展更加快速,幼叶上有水膜时,超过20分钟以上时间病原细菌即可侵入组织内为害(5)。通常在台风暴雨过后,造成柑橘植株叶片较多伤口,利于病原细菌侵入,诱致一个发病高峰期,有利于病原细菌之传播与蔓延,若遇干燥季节或无雨水,病害则少发生(1,2,7,8,14)。试验期间,5~6 月间最大累积雨量在169.1~735.2mm ,而帝王柚及莱姆之发病高峰期亦分别在4 月中旬至6 月下旬,由此得知病斑上的溃疡病菌能够透过雨水飞溅至幼叶上气孔或伤口上造成感染。

    嫩梢萌发后20~60 天或落花后幼果形成的35~80 天,气孔形成最多,病原细菌最易侵入,最容易罹病。至枝梢停止生长,叶片革质化,果实进入转色期,气孔不再形成,也进入气孔衰老期,气孔中隙紧闭,病原细菌难以感染罹病,则停止发病(2,7,8)。本试验调查发现柠檬及甜橘发病高峰期在3 月上旬~4月下旬,此时期适逢嫩梢萌发20天后,极适合侵染发病。落花后幼果形成的35天后,于6 月间调查果实溃疡病发病情形,罹病率较高依序是脐橙、帝王柚及莱姆。而罹病率较低的为文旦及柳橙。溃疡病菌在春季人工接种在稻草上可存活40~90 天,土壤中可残存60天。于秋季接种时在结缕草及稻草上存活200~300 天,土壤中可残存150 天(3),一般农药难达到理想防治效果,

    本试验进行室内药剂筛选及田间防治试验,结果显示,除了推荐药剂10% 维利霉素溶液外,以68.8 多保链霉素可湿性粉剂稀释1,000倍、85% 碱性氯氧化铜可湿性粉剂稀释300 倍与10% 链四环霉素水溶性粉剂稀释1,000倍均能有效的抑制柑桔溃疡病菌Xac-1的生长。10% 维利霉素溶液稀释500 倍与81% 嘉赐铜可湿性粉剂稀释1,000倍为柑橘溃疡病植物保护手册推荐用药,田间防治测试结果显示,连续施用10% 维利霉素溶液稀释500 倍五周后,可明显降低溃疡病之发生。但施用81% 嘉赐铜可湿性粉剂稀释1,000倍之防治效果较差,故溃疡病田间防治用药应再予以评估,以利本病害之田间防治。而本研究亦发现脐橙嫩叶在施用亚磷酸稀释500 倍,会引起肥伤,造成落叶伤,应避免使用。


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